药物代谢平台液质联用（LC-MS）测试送样指南及FAQ

药物代谢平台的液质联用仪有哪些种类？分别对应哪些测试需求？

药物代谢平台目前主要配置有液相色谱串联三重四极杆质谱6台（Agilent 6475、AB Qtrap 4500/5500/6500/75002），液相色谱串联高分辨质谱4台（AB Qtof 6600、Waters Synapt G2-Si Qtof、Thremo QE plus2）。三重四极杆质谱一般针对定量测试，测定单一或多种化合物在样品中的准确含量，常见应用包括血药浓度测定、内源性代谢物靶向代谢组学研究、中药化学成分定量分析等。高分辨质谱一般针对定性测试，测定复杂样品体系内的化合物精确分子量，并基于此预测化合物的分子式，根据质谱数据库检索结果预测该质谱信号可能化合物归属，给出可能结构。常见的应用包括非靶向代谢组学研究、中药复方的化学成分分析、药物代谢产物结构鉴定、蛋白组学及脂质组学等。

液相色谱串联质谱（LC-MS）能够分析哪些样品？

大部分的生物样品、食品、环境、材料样品经过合适的前处理方法后均可采用LC-MS方法进行定性定量分析，常见的样品包括血浆（血清）、细胞（内容物）、细胞器（线粒体、外泌体等）、动物组织（新鲜/冻存/匀浆）、植物种子、叶片（提取物）、药物制剂、中药材提取物、制剂、浸膏等。

LC-MS对于样品有哪些要求？

用户应充分了解自己的样品种类，平台可提供制定前处理方法，并协助用户进行实际样品的摸索和前处理操作，若用户自行进行样品前处理，应保证样品为适合LC-MS分析的完全溶解的澄清溶液，不含有无机杂质。常见的溶剂有乙腈、甲醇、异丙醇、水，为减轻溶剂效应，样品的溶剂最好是流动相的初始比例，如10%甲醇水溶液，20%乙腈水溶液等。为最大限度保护LC-MS仪器，确保样品能够正常测试，并得到高质量的质谱图，前处理完成的样品中应不含有难挥发性盐（如磷酸盐，硼酸盐等），不含有表面活性剂（甘油、吐温、十二烷基硫酸钠等），不含有腐蚀性酸、碱。尽量避免使用三丁胺、三乙胺等抑制ESI电离的化合物。平台提供氮吹仪、低温高速离心机、低温旋转蒸发仪、组织研磨仪、高通量涡旋仪等前处理设备供开放使用。

如何在药物代谢平台进行LC-MS预约？测试前需要进行哪些准备工作？

对于定性测试： 1）分子量测定类应用，用户需要提供待测物的分子式、分子量、预估浓度范围，对于非溶液状态样品，还应提供可供参考的溶解性信息。高分辨质谱测定小分子化合物分子量样品的浓度范围一般在100ng/mL到10μg/mL之间，应提供至少10μL溶液状态样品或1mg非溶液状态样品以供称量和测试；2）对于抗体药物、核酸等生物大分子表征应用，用户应提供浓度至少500μg/mL的蛋白样品，溶剂尽量为水或碳酸氢铵体系，体积至少10μL。平台可以提供trypsin等常见蛋白酶，若有特殊要求，需提前进行沟通；3）对于代谢组学、中药复方分析等复杂体系表征应用，用户应明确样品种类、选择合适的前处理方法，若有特殊关注的化合物或代谢通路等要求，需提前进行沟通。 对于定量测试： 在准备测试前先与平台进行沟通（具体联系人及联系方式见文末），通过沟通，平台会明确测试需求，制定初步方案。对于平台已经在LC-MS上开发了定量分析方法的化合物，用户可以直接按照平台提供的前处理方法进行样品准备，并进行定量测试。对于平台之前未开发方法的化合物，需遵守以下步骤： 1）准备待测物的标准品或对照品，通过查阅文献获得目前已有的色谱质谱条件、前处理方法等信息；2）在线上或前往郑裕彤E206填写送样信息表（包括待测物的分子量、分子式、溶剂及课题组、邮箱信息等）；3）明确待测样品的种类，并提供相应的空白样品，用户可自行进行样品前处理或委托平台辅助进行样品前处理；4）等待平台技术员进行个性化方法开发，一般从预约日期开始计算，大约1-2周内能够完成，确定方法后，平台会通知具体的送样时间和测试日期；5）按照已开发的前处理方法准确样品，进行测试；6）测试完成后平台提交测试报告，反馈结果。

如何联系药物代谢平台？

平台地址：清华大学郑裕彤医学楼E206 & E225； 办公室地址：清华大学郑裕彤医学楼E207 & E209； 平台线上预约网址： http://yqgx.tsinghua.edu.cn/webSite/websiteAction.do?ms=goToLabIndex&sysid=52104896 联系人：唐老师，010-62795450，tangyu@tsinghua.edu.cn。 初次预约送样测试，请以电话或邮件形式与平台取得联系。平台目前能够进行的测试和采用的仪器平台可参考下图，未包含在图中的测试需求请在预约测试前与平台进行沟通。

药物代谢平台目前能够进行哪些测试？

清华大学药学技术中心药物代谢平台委托测试预约流程

  1. 从Tsinghua Info或网页链接直接打开清华大学仪器共享服务平台主页； http://yqgx.tsinghua.edu.cn/

  2. 点击右上角登陆；

  3. 输入具有预约权限及测试费额度的用户名及密码；

  4. 在搜索框中输入测试对应的仪器编号或仪器名称，代谢平台的各委托测试仪器名称及编号如下表； 仪器名称 仪器编号 联系人 联系方式 AB Qtrap 6500 液质联用三重四级杆质谱系统 19014233 王卫华 010-62788677（王卫华、田国芳、韦芳） 010-62795450（唐煜） HPLC液相色谱仪 11029112 韦芳 ICS 5000+离子色谱仪 18007817 田国芳 QE Orbitrap高分辨液质联用仪 16029108 韦芳 Agilent 6460 三重四极杆液质联用仪 11029285 韦芳 Waters质谱引导制备液相 18008340 田国芳 Waters Synapt G2-Si Qtof高分辨液质联用仪 19014201 田国芳 Waters Xevo G2 Qtof 高分辨液质联用仪 12025820 田国芳 LABCONCO离心浓缩系统 11023384 唐煜

  5. 以Waters Synapt G2-Si Qtof 高分辨液质联用仪为例，在搜索框内输入仪器编号“19014201”，点击“找仪器”。在弹出的窗口中点击“委托实验”按钮；

  6. 仔细阅读平台送样说明，并点击“我已阅读并同意此说明”；

  7. 输入样品及测试需求中各项后，点击“提交”按钮；

  8. 点击提交后有时系统反应偏慢，显示“处理中”即为完成，也可以点击“我的实验预约”按钮确认登记状态。至此仪器共享平台上的委托测试登记用户操作部分已完成，用户请联系平台老师，告知已完成线上登记并等待完成测试。